裙底下的男友1V1校园高H,雯雯在工地被灌满精在线播放,噜噜狠狠色综合久色A站网址,波多野结衣高清无碼中文字幕

當前位置:
首頁 > 技術(shù)文章 > Rosetta(DE3)感受態(tài)細胞說明書
目錄導航 Directory
服務熱線
技術(shù)支持Article
Rosetta(DE3)感受態(tài)細胞說明書
點擊次數(shù):10059 更新時間:2015-05-27

 

Rosetta(DE3)感受態(tài)細胞說明書

 

Rosetta(DE3) Competent Cell

Rosetta(DE3)感受態(tài)細胞

目錄號:YJ0811

 

保存條件:-80℃保存。

 

組分說明

 

               Cat. No.                              YJ0811A

               Size                                   10×100 μl

               Rosetta (DE3) Competent Cell           10×100 μl

               Control DNA pUC19,0.1 ng/μl              10 μl

 

產(chǎn)品簡介

 

  本產(chǎn)品是采用進口Rosetta菌株,經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于DNA

的熱擊轉(zhuǎn)化。Rosetta菌株是攜帶氯霉素抗性質(zhì)粒BL21的衍生菌,補充大腸桿菌缺乏的

6種稀有密碼子( AUA,AGG,AGA,CUA,CCC,GGA)對應的tRNA,提高外源

基因,尤其是真核基因在原核系統(tǒng)中的表達水平。使用  pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可

達10 7

 

 

本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途

 

 

    注意事項

 

    1.感受態(tài)細胞一定要用干冰運輸。感受態(tài)細胞應在  -80℃下保存,不可多次凍融和放

       置時間過長,以免降低感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率。

    2.轉(zhuǎn)化所有步驟均在無菌條件下操作。

    3.包裝中有0.1 ng/μl的pUC19DNA,供對照試驗使用。

 

    操作步驟

 

    1.取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100 μl,可以根據(jù)實際情況分裝使用。

       以下實驗以50 μl感受態(tài)細胞為例。

    2.待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量

       的DNA,通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。

    3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘。

    4.每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150 rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇。

    5.根據(jù)實驗需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞,加到含相應抗生素的   SOC或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,

       倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時。

注意:1)涂布用量可根據(jù)具體實驗調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的DNA總量較多,可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板;若轉(zhuǎn)化的DNA總量較少,可取200-300 μl轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預計的克隆數(shù)較少,可通過離心(4,000 rpm,2分鐘)后吸除部分培養(yǎng)液,懸浮菌體后將其涂布于平板中。

 

       2)新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干,可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。

       3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少,可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

 

 

滬公網(wǎng)安備 31011802001676號

儿媳3中字免费完整在线| 17岁日本免费完整版观看| 少妇撒尿W搡BBB搡WBBB搡| 国内少妇偷人精品视频免费| 被男朋友摸下面流了很多血| 久久香蕉国产线熟妇人妻| 亚洲精品无码永久在线观看你懂的| 和朋友换娶妻当面做| 日本三级在线播放| 日本护士毛茸茸| A片扒开双腿进入做爽爽| 《风花雪月》香港在线观看| 欧美军警GAY巨大粗长| 国产精品永久免费| 日本人妻巨大乳挤奶水免费| 国产精品久久久久久岛| 无码AⅤ精品一区二区三区| 黄历2023黄道吉日查询| 亚洲欧洲精品一区二区三区波多野| 男朋友整根进去了但我没感觉| 办公室撕开奶罩揉吮奶漫画| 午夜精品久久久久久久无码| 亚洲A片无码一区二区蜜桃久久| 精品久久久久久亚洲精品| 免费看美女被靠到爽的视频| 丝袜老师办公室里做好紧好爽| 无遮挡国产高潮视频免费观看| 久久精品无码一区二区日韩av| XFPLAY5566色资源网站| 日韩一区二区三区精品| 最近免费中文MV在线字幕| 色婷婷五月| 成人小说亚洲一区二区三区| 人人人妻人人澡人人爽欧美一区| 我强行与岳的性关系| 夫妇交换性3中文字幕A片| 色综合久久网| 久久久久久精品成人免费图片| 国产一性一交一伦一A片| HKDOLL玩偶在线无码国产| 张开腿让我尿在里面(h)|